Anticorpi Western Blot

Abbiamo ciò di cui hai bisogno per un Western blot di successo!

I western blot richiedono più fasi: preparazione del campione, caricamento del campione, elettroforesi, trasferimento di proteine, incubazione degli anticorpi e rilevamento del segnale, quindi è importante essere sicuri che ogni fase venga eseguita correttamente.

Per un Western blot di successo offriamo:

Controllo Loading

Utilizzate l’anticorpo monoclonale H3pan di Diagenode come controllo di loading per i campioni nucleari per confrontare il livello di espressione proteica tra diversi campioni.

Western blot analysis using H3pan monoclonal antibody Western blot was performed on whole cell extracts (30 μg) from different cell types (lane 1: HeLa, lane 2: K562, lane 3: MCF7, lane 4: U2OS, lane 5: HepG2, lane 6: Jurkat, lane 7: NIH3T3, lane 8: E14Tg2a mouse ES cells) using the monoclonal antibody against H3. The antibody was diluted 1:1,000 in TBS-Tween containing 5% skimmed milk. The marker (in kDa) is shown on the left,and the position of the protein of interest is indicated on the right.

Perché hai bisogno di un controllo di loading?

• Per verificare che la stessa quantità di campione sia stata caricata sul gel
• Per confermare che l’elettrotrasferimento è stato eseguito in modo uniforme su tutte le linee
• Verificare che il rilevamento del segnale dopo l’incubazione degli anticorpi sia omogeneo su tutte le linee

Maggiori informazioni su questo anticorpo

Blue ladder-HRP monoclonal antibody

La maggior parte dei marcatori MW delle proteine prestainate utilizzati nel western blot contengono frammenti che sono marcati con un colorante blu. Diagenode ha sviluppato un nuovo anticorpo rivoluzionario che reagisce in modo specifico con questo colorante blu, consentendo la visualizzazione diretta dei diversi frammenti di marcatore sul blot. Ciò rende il posizionamento del marcatore e quindi il rilevamento accurato delle proteine molto più semplice.

• Rilevamento delle proteine più rapido e semplice: la marcatura manuale non è più necessaria
• Sviluppa il tuo marcatore direttamente su pellicola radiografica
• Consumo ridotto della scala
• Compatibile con la maggior parte delle scale colorate di blu
• Eccezionale specificità senza cross-reattività o background

Western blot analysis using the Diagenode Blue ladder – HRP monoclonal antibody PAGE analysis of 5 different protein MW markers: 1. Page Ruler Plus (Thermo, cat. No. 26619); 2. Color Plus broad range (NEB, cat. No. P7711); 3. Page Ruler (Unstained, Fermentas, cat. No. SM0661); 4. Spectra Multicolor (Fermentas, cat. No. SM1859); 5. Precision Plus (Biorad, cat. No. 161-0373). 4 μl of each marker was loaded on the gel. The right panel shows the Western blot analysis with the Diagenode Blue ladder – HRP antibody (cat. No. C1520202) diluted 1:1,000, using a standard Western blot protocol.

Western blot analysis using the Diagenode Blue ladder – HRP monoclonal antibody Protein extracts from different species were subjected to SDS-PAGE and analyzed by Western blot with the Diagenode Blue ladder – HRP antibody (Cat. No. C15200202), diluted 1:1,000. The results are shown on the right. The left figure shows a Ponceau staining of the gel. This figure clearly demonstrates that the antibody does not react with any proteins of the species that were tested.

Maggiori informazioni

Anticorpi validati in WB

Diagenode offre gli anticorpi selezionati per ottenere risultati di altissima qualità nel Western blot. L’elevata sensibilità e specificità dei nostri anticorpi consente di ottenere risultati più accurati.

I have been a Diagenode customer for over two years now. I have used the antibodies against the histone modifications H3K4me3, H3K4me2, H3K4me1, H3k27me3, H3K9ac, H3K27ac etc. provided by Diagenode to perform western blots.The high level of specificity of these antibodies in Pristionchus pacificus samples, confirmed by using several negative and positive controls run in parallel with synchronized culture samples, ensured successful and reproducible results.

Also, I am satisfied with the service and the support of personnel of Diagenode. They are prompt in replying to my emails and very helpful with their advice. Thanks a lot!

– Vahan Serobyan, Prof. Dr Ralf J. Sommer’s Lab, Max Planck Institute for Developmental Biology, Tübingen, Germany

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