StabyExpress™ kits
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Il kit StabyExpress™ T7 contiene tutti gli elementi necessari per il cloning del gene d’interesse e la sua espressione Escherichia coli. Il kit unisce 2 tecnologie (espressione T7 e stabilizzazione Staby-plasmide) che permettono elevate rese nell’espressione della proteina e nella standardizzazione del protocollo doi produzione. Sono disponibili vettori His-tag e/o GST-tag. Batteri competenti addizionali CYS21 e SE1 possono essere acquistati separatamente. |
Nel sistema plasmide-stabilità, il gene antidoto è introdotto nel DNA plasmide sotto il controllo di un promotore costitutivo. Dall’altra parte, il gene tossico è introdotto nel cromosoma del batterio. L’espressione del gene veleno è sotto il controllo di un promotore strettamente represso da una proteina antidoto. Quando il plasmide è presente nel batterio, il veleno non è espresso/prodotto. Quando invece il plasmide viene perso, l’antidoto è degradato e viene indotta la produzione della tossina causando la morte della cellula.
Il sistema è stato studiato in E.Coli e i risultati mostrano una perfetta stabilizzazione del plasmide per diversi vettori che sono normalmente instabili senza questa tecnologia. Nel kit the StabyExpress™ T7 questa tecnologia viene applicata alla produzione di proteine utilizzando i lpromotore T7.
Il kit StabyExpressTM T7 expression permette (i) il cloning del gene d’interesse in un plasmide stabilizzato e (ii) l’espressione T7 della proteina d’interesse. Ogni kit contiene il DNA plasmide di un vettore pStaby (sia pStaby1.2 o pStabyGST1.2), cellule competenti CYS21 per il cloning, batteri competenti SE1 per l’espressione, medium di rigenerazione, sequencing primers, controllo d’espressione, e manuale d’uso.
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Mappa Vettori
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