Il kit Staby™Codon T7 combina 3 tecnologie per assicurare elevata resa e espressione stadardizzata di proteine eucariotiche “difficili” in E.coli: (i) un forte promotore T7-controllato, (ii) geni di stabilizzazione ccdA/ccdB, e (iii) cassette di espressione codone ottimizzate per l’espressione efficiente di codoni rari contenuti nelle proteine. Sono disponibili vettori contenenti GST-tag. Batteri competenti addizionali possono essere acquistati separatamente. Elevata resa di espressione proteine eterologhe anche in presenza di codoni rari NON è necessario mutare ogni codone raro Plasmide ricombinante perfettamente stabilizzato anche senza l’uso di antibiotici Ridotto background dovuto a proteina ospite NO plasmidi addizionali nei batteri NON vengono osservate colonie “satelliti” anche dopo incubazione prolungata

Per valutare l’efficienza del kit  Staby™ Codon T7, un frammento di DNA codificante per una proteina umana che contiene 24 codoni rari (10 proline, 7 arginine, 3 isoleucine, 3 leucine e 1 glycina) è stato clonato in Staby1 e pSCodon1. Questi plasmidi sono stati trasformati in SE1. Come illustrato in figura a destra, la proteina non è o è a bassissimo livello prodotta utilizzando pStaby1, ma è chiaramente visibile con pSCodon1.  La proteina è stata purificata e la sua integrità confermata tramite Spettrometria di Massa.

Il kit Staby^TMCodon T7 contiene  vettori ( pSCodon1.3 o pSCodonGST1.2), batteri chemically- o electro- competenti per il cloning (CYS21) e l’espressione (SE1), medium di rigenerazione, sequencing primers, controllo positivo e manuale d’uso.

Mappa Vettori

Download Brochure